對硝酸纖維素膜進行深入討論和談一些應用技巧

　　今天凯发真人在线對硝酸纖維素膜進行深入討論和談一些應用技巧。話不多說下麵讓凯发真人在线一起來了解一下吧。
 

　　1、蛋白與膜的結合原理
 

　　蛋白與膜的結合原理，已知的結合力包括疏水作用力\H鍵\靜電作用力等，確切的結合原理並不明確，主要靠假說來支撐。主要有兩種假說:
 

　　1)首先兩者靠靜電作用力結合，然後靠H鍵和疏水作用來維持長時間結合。
 

　　2)首先兩者靠疏水作用結合，然後靠靜電作用來維持長時間結合。
 

　　兩條假說，都表明其結合過程分為兩步，首先結合和後麵長時間結合。由於結合原理的不明確性，導致在這方麵的工作非常依賴實踐經驗。
 

　　2、膜對結合的影響
 

　　1)膜孔徑
 

　　有些技術人員傾向使用膜孔徑來區分不同的膜，但是請注意這隻僅僅限於同一廠家的產品，如果是不同廠家的產品，這種比較是無意義的。膜孔徑與層析速度的關係，已在上文描述。
 

　　隨著膜孔徑減小，膜的實際可用表麵積遞增，膜結合蛋白的量也遞增。估量表麵積的參數為表麵積比率(實際可用表麵積與所用膜平麵積的比率)。
 

　　另外，膜孔徑越小，層析速度也越小，那麽金標複合物通過T線的時間也就越長，反應也就越充分。
 

　　綜合以上兩點，結論為膜孔徑越小靈敏度越高。但是同時也減慢了跑板速度，增加了非特異性結合的機會，也就是假陽性越高。所以要按照試驗結果挑選適合實際項目的膜，找到合適的平衡點。
 

　　2)不同廠家的膜差異
 

　　這個差異主要來源於兩點:
 

　　1>生產膜時，使用的聚合物和表麵活性劑的來源，類型，數量不同。同理，在膜處理中這兩類物質一般會對性能產生較大影響。
 

　　2>處理過程不同。
 

　　3、生物原料，緩衝溶液的試劑和配方
 

　　1)生物原料，作為CT線的生物原料使用情況各異，所以這裏隻做略述。
 

　　首先，單克隆抗體與膜的結合優於多克隆抗體，主要時由於多克隆抗體有很多不同的表麵位點，而各位點與膜的最佳結合條件都有細微的差別，毫無疑問就增加了優化難度。
 

　　其次，分子量越大，蛋白越難結合到固相材料上。